surgoncoКреативная хирургия и онкологияCreative surgery and oncology2076-30932307-0501Башкирский государственный медицинский университет10.24060/2076-3093-2021-11-4-328-336surgonco-637Research ArticleКЛИНИЧЕСКИЙ СЛУЧАЙCLINICAL CASESСубпопуляции интратуморальных эффекторных клеток при раке молочной железы (обзор литературы и представление собственных данных)Intratumoural Effector Cell Subpopulations in Breast Cancer: a Literature Review and Own Data ReportРябчиковД. А.RyabchikovD. A.

Рябчиков Денис Анатольевич, д.м.н., хирургическое отделение № 16

Москва

Denis A. Ryabchikov, Dr. Sci. (Med.), Department of Surgery No. 16

Moscow

dr.denisr@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-4412-5019ЧулковаС. В.ChulkovaS. V.

Чулкова Светлана Васильевна, к.м.н., доцент, лаборатория иммунологии гемопоэза, кафедра онкологии и лучевой терапии

Москва

Svetlana V. Chulkova, Cand. Sci. (Med.), Assoc. Prof., Laboratory of Haematopoiesis Immunology, Department of Oncology and Radiotherapy

Moscow

ШамиловФ. А.ShamilovF. A.

Шамилов Фархад Азерович, к.м.н., хирургическое отделение № 16

Москва

Farkhad A. Shamilov, Cand. Sci. (Med.), Department of Surgery No. 16

Moscow

https://orcid.org/0000-0001-7903-6417ЧантурияН. В.ChanturiyaN. V.

Чантурия Наили Валерьевна, кафедра онкологии факультета дополнительного профессионального образования, хирургическое отделение № 16

Москва

Naily V. Chanturiya, Department of Oncology for Advanced Professional Education, Department of Surgery No. 16

Moscow

https://orcid.org/0000-0002-5292-5924ЖелтиковС. Д.ZheltikovS. D.

Желтиков Сергей Дмитриевич, кафедра онкологии факультета дополнительного профессионального образования, хирургическое отделение № 16

Москва

Sergey D. Zheltikov, Department of Oncology for Advanced Professional Education, Department of SurgeryNo. 16

Moscow

ТупицынН. Н.TupitsynN. N.

Тупицын Николай Николаевич, д.м.н., профессор, лаборатория иммунологии гемопоэза

Москва

Nikolay N. Tupitsyn, Dr. Sci. (Med.), Prof., Laboratory of Haematopoiesis Immunology

Moscow

Национальный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н.Н. БлохинаРоссияN.N. Blokhin National Medical Research Centre of OncologyRussian FederationНациональный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н.Н. Блохина; Российский национальный исследовательский медицинский университет им. И.И. ПироговаРоссияN.N. Blokhin National Medical Research Centre of Oncology; I.I. Pirogov Russian National Research Medical UniversityRussian FederationНациональный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н.Н. Блохина; Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. ЕвдокимоваРоссияN.N. Blokhin National Medical Research Centre of Oncology; A.I. Yevdokimov Moscow State University of Medicine and DentistryRussian Federation202121122021114328336Copyright © Рябчиков Д.А., Чулкова С.В., Шамилов Ф.А., Чантурия Н.В., Желтиков С.Д., Тупицын Н.Н., 20212021Рябчиков Д.А., Чулкова С.В., Шамилов Ф.А., Чантурия Н.В., Желтиков С.Д., Тупицын Н.Н.Ryabchikov D.A., Chulkova S.V., Shamilov F.A., Chanturiya N.V., Zheltikov S.D., Tupitsyn N.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.surgonco.ru/jour/article/view/637

Рак молочной железы (РМЖ) является самым распространенным злокачественным новообразованием у женщин в мире. Несмотря на достигнутые успехи в диагностике РМЖ и новейшие лекарственные режимы лечения, остается еще целый ряд нерешенных задач, связанных с  развитием опухолевой резистентности и, как следствие, прогрессированием заболевания. Одним из факторов, определяющих устойчивость опухоли к современным методам лечения, является ее способность уклоняться от иммунного ответа. Поэтому на сегодняшний день учеными всего мира достаточно много внимания уделяется изучению механизмов взаимодействия опухоли с иммунной системой организма.

Известно, что микроокружение опухоли вносит значительный вклад в формирование характера данного взаимодействия. Частью микроокружения опухоли являются иммунные клетки, которые могут быть опухольассоциированными макрофагами, супрессорными клетками миелоидного происхождения, опухоль-инфильтрирующими лимфоцитами. Лимфоциты, инфильтрирующие опухоль, представлены В-, Т-, NK-клетками, локализация которых и их субпопуляционный состав в опухоли могут иметь разное прогностическое и клиническое значение. Плотность инфильтрации отдельными видами эффекторных клеток до химиотерапии служит важным предиктором выживаемости больных. Иными словами, присутствие субпопуляций эффекторных лимфоцитов в опухоли характеризует степень напряженности противоопухолевого иммунного ответа и может определять успешность лекарственного лечения.

В данном исследовании проанализированы уровни инфильтрации CD3, CD4, CD20, СD38  лимфоцитами при нескольких молекулярных подтипах РМЖ. Иммунофенотипирование опухоли проведено на криостатных срезах методом иммунофлуоресценции (микроскоп Zeiss (Axioskop, Германия)). Проанализированы 96  образцов люминального РМЖ (37 (38,5  %)  — подтип А; 52 (54,2  %)  — В-Her2-негативный подтип; 7 (7,3  %)  — В-Her2-позитивный подтип) и нелюминального РМЖ (3 (14,3 %) — HER2+ подтип; 18 (85,7 %) — трижды негативный подтип). Оценивались характер инфильтрации и выраженность экспрессии антигенов. Анализ уровня инфильтрации субпопуляциями лимфоцитов установил, что при люминальном РМЖ выраженность инфильтрации меньше, чем при других подтипах, однако достоверной связи не обнаружено.

Breast cancer (BC) is most prevalent female malignancy worldwide. Despite advances in BC diagnosis and progress in drug therapy, a series of challenges associated with emergent tumour resistance causing the disease escalation still remain. Immune evasion is among the driving forces of tumour resistance against modern treatments, which promotes world-active research into the mechanisms of tumour—immune interaction.

Tumour microenvironment is known to contribute greatly to the nature of this interaction. Immune cells are constitutive of tumour microenvironment as tumour-associated macrophages, myeloid-derived suppressor cells and tumour-infi ltrating lymphocytes. Tumour-infi ltrating lymphocytes are represented by B-, T- and NK-cells, which localisation and subpopulation structure in tumour may possess a prognostic and clinical significance. Th e infi ltration density by certain effector cell types prior to chemotherapy is an important predictor of patient survival. Putting otherwise, the presence of effector lymphocyte subpopulations in tumour defi nes the strength of antitumour immunity and may establish the success of drug treatment.

This study analysed the infiltration levels of CD3, CD4, CD20 and CD38 lymphocytes in several molecular BC subtypes. Tumour immunophenotyping was performed in cryosectioning and immunofl uorescence assays with a ZEISS AXIOSKOP microscope, Germany. We analysed 96 luminal BC (37 subtype A (38.5 %), 52 B-Her2-negative subtype (54.2 %), 7 B-Her2-positive subtype (7.3 %)) and non-luminal BC samples (3 HER2+ subtype (14.3 %), 18 triple-negative subtype (85.7 %)). The infiltration and antigen expression patterns have been assessed. Analyses of tumour-infi ltrating subpopulations revealed lower infiltration in luminal BC vs. other subtypes, albeit at no significance.

рак молочной железымолекулярные подтипыопухоль-инфильтрирующие лимфоцитыэффекторные лимфоцитыиммунофлюоресцентный анализиммунофенотипированиеbreast cancermolecular subtypestumour-infi ltrating lymphocyteseff ector lymphocytesimmunofl uorescent assayimmunophenotypingReferencesFerlay J., Colombet M., Soerjomataram I., Parkin D.M., Piñeros M., Znaor A., et al. Cancer statistics for the year 2020: An overview. Int J Cancer. 2021 Apr 5. DOI: 10.1002/ijc.33588Ferlay J., Colombet M., Soerjomataram I., Parkin D.M., Piñeros M., Znaor A., et al. Cancer statistics for the year 2020: An overview. Int J Cancer. 2021 Apr 5. DOI: 10.1002/ijc.33588Каприн А.Д., Старинский В.В., Петрова Г.В. Злокачественные новообразования в России в 2018 году (заболеваемость и смертность). М.; 2019.Kaprin A.D., Starinskiy V.V., Petrova G.V. Malignant neoplasms in Russia in 2019 (morbidity and mortality). Мoscow; 2019 (In Russ.).Crabtree J.S., Miele L. Breast cancer stem cells. Biomedicines. 2018;6(3):77. DOI: 10.3390/biomedicines6030077Crabtree J.S., Miele L. Breast cancer stem cells. Biomedicines. 2018;6(3):77. DOI: 10.3390/biomedicines6030077Чулкова С.В., Тупицын Н.Н., Джуманазаров Т.М., Палладина А.Д., Купрышина Н.А., Чернышева О.А. и др. Обнаружение диссеминированных опухолевых клеток в костном мозге больных немелколеточным раком легкого. Российский биотерапевтический журнал. 2020;19(3):29–37. DOI: 10.17650/1726-9784-2020-19-3-29-37Chulkova S.V., Tupitsyn N.N., Djumanazarov T.M., Palladina A.D., Kupryshina N.A., Chernysheva O.A., et al. Detection of disseminated tumor cells in the bone marrow of patients with non-small cell lung cancer. Russian Journal of Biotherapy. 2020;19(3):29–37 (In Russ.). DOI: 10.17650/1726-9784-2020-19-3-29-37Wimberly H., Brown J.R., Schalper K., Haack H., Silver M.R., Nixon C., et al. PD-L1 expression correlates with tumor-infi ltrating lymphocytes and response to neoadjuvant chemotherapy in breast cancer. Cancer Immunol Res. 2015;3(4):326–32. DOI: 10.1158/2326-6066.CIR-14- 0133Wimberly H., Brown J.R., Schalper K., Haack H., Silver M.R., Nixon C., et al. PD-L1 expression correlates with tumor-infi ltrating lymphocytes and response to neoadjuvant chemotherapy in breast cancer. Cancer Immunol Res. 2015;3(4):326–32. DOI: 10.1158/2326-6066.CIR-14-0133Чулкова С.В., Маркина И.Г., Антипова А.С., Грищенко Н.В., Пустынский И.В., Егорова А.В. и др. Роль стволовых опухолевых клеток в канцерогенезе и прогнозе меланомы. Вестник Российского научного центра рентгенорадиологии. 2018;18(4):100–16.Chulkova S.V., Markina I.G., Antipova A.S., Grishchenko N.V., Pustynsky I.V., Egorova A.V., et al. The role of stem tumor cells in caricogenesis and the forecast of melanoma. Vestnik Rossiiskogo nauchnogo centra rentgenoradiologii. 2018;18(4):100–16 (In Russ.).Рябчиков Д.А., Абдуллаева Э.И., Дудина И.А., Чулкова С.В., Денчик Д.А., Чхиквадзе Н.В. и др. Роль микро-РНК в канцерогенезе и прогнозе злокачественных новообразований молочной железы. Вестник Российского научного центра рентгенорадиологии. 2018;18(2):5.Ryabchikov D.A., Abdullaeva E.I., Dudina I.A., Chulkova S.V., Denchik D.A., Chkhikvadze N.V., et al. The role of micro-RNA in cancerogenesis and breast cancer prognosis. Vestnik Rossiiskogo nauchnogo centra rentgenoradiologii. 2018;18(2):5 (In Russ.).Чулкова С.В. Биомаркеры стволовых клеток желудка. Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2018;21(10):11–7. DOI: 10.29296/25877313-2018-10-02Chulkova S.V. Stomach cancer stem cell biomarkers. problems of biological, medical and pharmaceutical chemistry. 2018;21(10):11–7 (In Russ.). DOI: 10.29296/25877313-2018-10-02Chernysheva O., Markina I., Demidov L., Kupryshina N., Chulkova S., Palladina A., et al. Bone marrow involvement in melanoma. Potentials for detection of disseminated tumor cells and characterization of their subsets by fl ow cytometry. Cells. 2019;8(6):627. DOI: 10.3390/ cells8060627Chernysheva O., Markina I., Demidov L., Kupryshina N., Chulkova S., Palladina A., et al. Bone marrow involvement in melanoma. Potentials for detection of disseminated tumor cells and characterization of their subsets by flow cytometry. Cells. 2019;8(6):627. DOI: 10.3390/cells8060627Mao Y., Qu Q., Chen X., Huang O., Wu J., Shen K. Th e prognostic value of tumor-infi ltrating lymphocytes in breast cancer: a systematic review and meta-analysis. PLoS One. 2016;11(4):e0152500. DOI: 10.1371/ journal.pone.0152500Mao Y., Qu Q., Chen X., Huang O., Wu J., Shen K. The prognostic value of tumor-infi ltrating lymphocytes in breast cancer: a systematic review and meta-analysis. PLoS One. 2016;11(4):e0152500. DOI: 10.1371/journal.pone.0152500Титов К.С., Казаков А.М., Барышникова М.А., Рябчиков Д.А., Чулкова С.В., Зарьянов Д.А. Некоторые молекулярные и иммунологические факторы прогноза трижды негативного рака молочной железы. Онкогинекология. 2019;4(32):26–34. DOI: 10.52313/22278710_2019_4_26Titov K.S., Kazakov A.M., Baryshnikova M.A., Ryabchikov D.A., Chulkova S.V., Zaryanov D.A. Some molecular and immunologic prognostic factors of triple negative breast cancer. Gynecologic Oncology. 2019;4(32):26–34 (In Russ.). DOI: 10.52313/22278710_2019_4_26Рябчиков Д.А., Воротников И.К., Талипов О.А., Чулкова С.В., Логинов В.И., Снеговой А.В. и др. Микро-РНК и их роль в патогенезе и диагностике рака молочной железы. Медицинский алфавит. 2020;8:12–5. DOI: 10.33667/2078-5631-2020-8-12-15Ryabchikov D.A., Vorotnikov I.K., Talipov O.A., Chulkova S.V., Loginov V.I., Snegovoy A.V., et al. MicroRNA and their role in pathogenesis and diagnosis of breast cancer. Medical alphabet. 2020;8:12–5 (In Russ.). DOI: 10.33667/2078-5631-2020-8-12-15Liu X., Feng D., Liu D., Wang S., Yu X., Dai E., et al. Dissecting the origin of breast cancer subtype stem cell and the potential mechanism of malignant transformation. PLoS One. 2016;11(10):e0165001.7. DOI: 10.1371/journal.pone.0165001Liu X., Feng D., Liu D., Wang S., Yu X., Dai E., et al. Dissecting the origin of breast cancer subtype stem cell and the potential mechanism of malignant transformation. PLoS One. 2016;11(10):e0165001.7. DOI: 10.1371/journal.pone.0165001Zhou J., Chen Q., Zou Y., Chen H., Qi L., Chen Y. Stem cells and cellular origins of breast cancer: updates in the rationale, controversies, and therapeutic implications. Front Oncol. 2019;9:820. DOI: 10.3389/ fonc.2019.00820Zhou J., Chen Q., Zou Y., Chen H., Qi L., Chen Y. Stem cells and cellular origins of breast cancer: updates in the rationale, controversies, and therapeutic implications. Front Oncol. 2019;9:820. DOI: 10.3389/ fonc.2019.00820Чулкова С.В., Рябчиков Д.А., Дудина И.А., Казаков А.М., Егорова А.В., Титов К.С. и др. Перспективы использования микро-РНК в качестве диагностических и прогностических маркеров меланомы. Российский биотерапевтический журнал. 2019;18(4):51–6.Chulkova S.V., Ryabchikov D.A., Dudina I.A., Kazakov A.M., Egorova A.V., Titov K.S., et al. The prospects for the use of microrna as diagnostic and prognostic melanoma biomarkers. Russian Journal of Biotherapy. 2019;18(4):51–6 (In Russ.). DOI: 10.17650/1726-9784- 2019-18-4-51-56Denkert C., von Minckwitz G., Darb-Esfahani S., Lederer B., Heppner B.I., Weber K.E., et al. Tumour-infi ltrating lymphocytes and prognosis in diff erent subtypes of breast cancer: a pooled analysis of 3771 patients treated with neoadjuvant therapy. Lancet Oncol. 2018;19(1):40–50. DOI: 10.1016/S1470-2045(17)30904-XDenkert C., von Minckwitz G., Darb-Esfahani S., Lederer B., Heppner B.I., Weber K.E., et al. Tumour-infi ltrating lymphocytes and prognosis in diff erent subtypes of breast cancer: a pooled analysis of 3771 patients treated with neoadjuvant therapy. Lancet Oncol. 2018;19(1):40–50. DOI: 10.1016/S1470-2045(17)30904-XРябчиков Д.А., Безнос О.А., Дудина И.А., Воротников И.К., Денчик Д.А., Чулкова С.В. и др. Диссеминированные опухолевые клетки у пациентов с люминальным раком молочной железы. Российский биотерапевтический журнал. 2018;17(1):53–7. DOI: 10.17650/1726-9784-2018-17-1-53-57Ryabchikov D.A., Beznos O.A., Dudina I.A., Vorotnikov I.K., Denchik D.A., Chulkova S.V., et al. DIsseminated tumor cells of luminal breast cancer patients. Russian Journal of Biotherapy. 2018;17(1):53–7 (In Russ.). DOI: 10.17650/1726-9784-2018-17-1-53-57Chang R.B., Beatty G.L. Th e interplay between innate and adaptive immunity in cancer shapes the productivity of cancer immunosurveillance. J Leukoc Biol. 2020;108(1):363–76. DOI: 10.1002/ JLB.3MIR0320-475RChang R.B., Beatty G.L. The interplay between innate and adaptive immunity in cancer shapes the productivity of cancer immunosurveillance. J Leukoc Biol. 2020;108(1):363–76. DOI: 10.1002/ JLB.3MIR0320-475RGerada Ch., Ryan K.M. Autophagy, the innate immune response and cancer. Mol Oncol. 2020;14(9):1913–29. DOI: 10.1002/1878- 0261.12774Gerada Ch., Ryan K.M. Autophagy, the innate immune response and cancer. Mol Oncol. 2020;14(9):1913–29. DOI: 10.1002/1878- 0261.12774Чулкова С.В., Стилиди И.С., Глухов Е.В., Гривцова Л.Ю., Неред С.Н., Тупицын Н.Н. Селезенка — периферический орган иммунной системы. Влияние спленэктомии на иммунный статус. Вестник РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН. 2014;25(1–2(94)):21–5.Chulkova S.V., Stilidi I.S., Glukhov E.V., Grivtsova L.Yu., Nered S.N., Tupitsyn N.N. The spleen as a peripheral immunity organ. Splenectomy eff ect on the immunity status. Journal of N.N. Blokhin Russian Cancer Research Center. 2014;25(1–2(94)):21–25 (In Russ.).Sonnenberg G.F., Hepworth M.R. Functional interactions between innate lymphoid cells and adaptive immunity. Nat Rev Immunol. 2019;19(10):599–613. DOI: 10.1038/s41577-019-0194-8Sonnenberg G.F., Hepworth M.R. Functional interactions between innate lymphoid cells and adaptive immunity. Nat Rev Immunol. 2019;19(10):599–613. DOI: 10.1038/s41577-019-0194-8Чулкова С.В., Шолохова Е.Н., Грищенко Н.В., Рябчиков Д.А., Гривцова Л.Ю., Базин И.С. и др. Ключевая роль популяций В1-лимфоцитов в иммунном ответе у больных раком желудка. Российский биотерапевтический журнал. 2018;17(4):64–70.Chulkova S.V., Sholokhova E.N., Grishchenko N.V., Ryabchikov D.A., Grivtsova L.Yu., Bazin I.S., et al. The role of B-1 lymphocytes in antitumor immunity in patients with gastric cancer. Russian Journal of Biotherapy. 2018;17(4):64–70 (In Russ.). DOI: 10.17650/1726- 9784-2018-17-4-64-70Martinez F.O., Sica A., Mantovani A., Locati M. Macrophage activation and polarization. Front Biosci. 2008;13:453–61. DOI: 10.2741/2692Martinez F.O., Sica A., Mantovani A., Locati M. Macrophage activation and polarization. Front Biosci. 2008;13:453–61. DOI: 10.2741/2692Chaudhary B., Elkord E. Regulatory T cells in the tumor microenvironment and cancer progression: role and therapeutic targeting. Vaccines (Basel). 2016;4(3):28. DOI: 10.3390/vaccines4030028Chaudhary B., Elkord E. Regulatory T cells in the tumor microenvironment and cancer progression: role and therapeutic targeting. Vaccines (Basel). 2016;4(3):28. DOI: 10.3390/vaccines4030028Kim J.H., Kim B.S., Lee S.K. Regulatory T cells in tumor microenvironment and approach for anticancer immunotherapy. Immune Netw. 2020;20(1):e4. DOI: 10.4110/in.2020.20.e4Kim J.H., Kim B.S., Lee S.K. Regulatory T cells in tumor microenvironment and approach for anticancer immunotherapy. Immune Netw. 2020;20(1):e4. DOI: 10.4110/in.2020.20.e4Gu-Trantien C., Loi S., Garaud S., Equeter C., Libin M., de Wind A., et al. CD4+ follicular helper T cell infi ltration predicts breast cancer survival. J Clin Invest. 2013;123(7):2873–92. DOI: 10.1172/JCI67428Gu-Trantien C., Loi S., Garaud S., Equeter C., Libin M., de Wind A., et al. CD4⁺ follicular helper T cell infiltration predicts breast cancer survival. J Clin Invest. 2013;123(7):2873–92. DOI: 10.1172/ JCI67428Grzywa T.M., Sosnowska A., Matryba P., Rydzynska Z., Jasinski M., Nowis D., et al. Myeloid cell-derived arginase in cancer immune response. Front Immunol. 2020;11:938. DOI: 10.3389/fi mmu.2020.00938Grzywa T.M., Sosnowska A., Matryba P., Rydzynska Z., Jasinski M., Nowis D., et al. Myeloid cell-derived arginase in cancer immune response. Front Immunol. 2020;11:938. DOI: 10.3389/ fi mmu.2020.00938Zhao X., Qu J., Sun Y., Wang J., Liu X., Wang F., et al. Prognostic signifi cance of tumor-associated macrophages in breast cancer: a meta-analysis of the literature. Oncotarget. 2017;8(18):30576–86. DOI: 10.18632/oncotarget.15736Zhao X., Qu J., Sun Y., Wang J., Liu X., Wang F., et al. Prognostic signifi cance of tumor-associated macrophages in breast cancer: a meta-analysis of the literature. Oncotarget. 2017;8(18):30576–86. DOI: 10.18632/oncotarget.15736Gao G., Wang Z., Qu X., Zhang Z. Prognostic value of tumor-infi ltrating lymphocytes in patients with triple-negative breast cancer: a systematic review and meta-analysis. BMC Cancer. 2020;20(1):179. DOI: 10.1186/s12885-020-6668-zGao G., Wang Z., Qu X., Zhang Z. Prognostic value of tumor-infi ltrating lymphocytes in patients with triple-negative breast cancer: a systematic review and meta-analysis. BMC Cancer. 2020;20(1):179. DOI: 10.1186/s12885-020-6668-zShang B., Liu Y., Jiang S.J., Liu Y. Prognostic value of tumor-infi ltrating FoxP3+ regulatory T cells in cancers: a systematic review and metaanalysis. Sci Rep. 2015;5:15179. DOI: 10.1038/srep15179Shang B., Liu Y., Jiang S.J., Liu Y. Prognostic value of tumor-infi ltrating FoxP3+ regulatory T cells in cancers: a systematic review and meta-analysis. Sci Rep. 2015;5:15179. DOI: 10.1038/srep15179Kawai O., Ishii G., Kubota K., Murata Y., Naito Y., Mizuno T., et al. Predominant infi ltration of macrophages and CD8(+) T Cells in cancer nests is a signifi cant predictor of survival in stage IV nonsmall cell lung cancer. Cancer. 2008;113(6):1387–95. DOI: 10.1002/cncr.23712Kawai O., Ishii G., Kubota K., Murata Y., Naito Y., Mizuno T., et al. Predominant infi ltration of macrophages and CD8(+) T Cells in cancer nests is a signifi cant predictor of survival in stage IV nonsmall cell lung cancer. Cancer. 2008;113(6):1387–95. DOI: 10.1002/cncr.23712Hornychova H., Melichar B., Tomsova M., Mergancova J., Urminska H., Ryska A. Tumor-infi ltrating lymphocytes predict response to neoadjuvant chemotherapy in patients with breast carcinoma. Cancer Invest. 2008;26(10):1024–31. DOI: 10.1080/07357900802098165Hornychova H., Melichar B., Tomsova M., Mergancova J., Urminska H., Ryska A. Tumor-infi ltrating lymphocytes predict response to neoadjuvant chemotherapy in patients with breast carcinoma. Cancer Invest. 2008;26(10):1024–31. DOI: 10.1080/07357900802098165Schreiber R.D., Old L.J., Smyth M.J. Cancer immunoediting: integrating immunity’s roles in cancer suppression and promotion. Science. 2011;331(6024):1565–70. DOI: 10.1126/science.1203486Schreiber R.D., Old L.J., Smyth M.J. Cancer immunoediting: integrating immunity’s roles in cancer suppression and promotion. Science. 2011;331(6024):1565–70. DOI: 10.1126/science.1203486Cimino-Mathews A., Ye X., Meeker A., Argani P., Emens L.A. Metastatic triple-negative breast cancers at fi rst relapse have fewer tumorinfi ltrating lymphocytes than their matched primary breast tumors: a pilot study. Hum Pathol. 2013;44(10):2055–63. DOI: 10.1016/j. humpath.2013.03.010Cimino-Mathews A., Ye X., Meeker A., Argani P., Emens L.A. Metastatic triple-negative breast cancers at fi rst relapse have fewer tumorinfi ltrating lymphocytes than their matched primary breast tumors: a pilot study. Hum Pathol. 2013;44(10):2055–63. DOI: 10.1016/j. humpath.2013.03.010Ruff ell B., Au A., Rugo H.S., Esserman L.J., Hwang E.S., Coussens L.M. Leukocyte composition of human breast cancer. Proc Natl Acad Sci USA. 2012;109(8):2796–801. DOI: 10.1073/pnas.1104303108Ruff ell B., Au A., Rugo H.S., Esserman L.J., Hwang E.S., Coussens L.M. Leukocyte composition of human breast cancer. Proc Natl Acad Sci USA. 2012;109(8):2796–801. DOI: 10.1073/pnas.1104303108Gobert M., Treilleux I., Bendriss-Vermare N., Bachelot T., GoddardLeon S., Arfi V., et al. Regulatory T cells recruited through CCL22/ CCR4 are selectively activated in lymphoid infi ltrates surrounding primary breast tumors and lead to an adverse clinical outcome. Cancer Res. 2009;69(5):2000–9. DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-08-2360Gobert M., Treilleux I., Bendriss-Vermare N., Bachelot T., GoddardLeon S., Arfi V., et al. Regulatory T cells recruited through CCL22/ CCR4 are selectively activated in lymphoid infi ltrates surrounding primary breast tumors and lead to an adverse clinical outcome. Cancer Res. 2009;69(5):2000–9. DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-08-2360Ismael G., Hegg R., Muehlbauer S., Heinzmann D., Lum B., Kim S.B., et al. Subcutaneous versus intravenous administration of (neo) adjuvant trastuzumab in patients with HER2-positive, clinical stage I-III breast cancer (HannaH study): a phase 3, open-label, multicentre, randomised trial. Lancet Oncol. 2012;13(9):869–78. DOI: 10.1016/ S1470-2045(12)70329-7Ismael G., Hegg R., Muehlbauer S., Heinzmann D., Lum B., Kim S.B., et al. Subcutaneous versus intravenous administration of (neo)adjuvant trastuzumab in patients with HER2-positive, clinical stage I-III breast cancer (HannaH study): a phase 3, open-label, multicentre, randomised trial. Lancet Oncol. 2012;13(9):869–78. DOI: 10.1016/ S1470-2045(12)70329-7Denkert C., Loibl S., Noske A., Roller M., Müller B.M., Komor M., et al. Tumor-associated lymphocytes as an independent predictor of response to neoadjuvant chemotherapy in breast cancer. J Clin Oncol. 2010;28(1):105–13. DOI: 10.1200/JCO.2009.23.7370Denkert C., Loibl S., Noske A., Roller M., Müller B.M., Komor M., et al. Tumor-associated lymphocytes as an independent predictor of response to neoadjuvant chemotherapy in breast cancer. J Clin Oncol. 2010;28(1):105–13. DOI: 10.1200/JCO.2009.23.7370Mahmoud S.M., Paish E.C., Powe D.G., Macmillan R.D., Grainge M.J., Lee A.H., et al. Tumor-infi ltrating CD8+ lymphocytes predict clinical outcome in breast cancer. J Clin Oncol. 2011;29(15):1949–55. DOI: 10.1200/JCO.2010.30.5037Mahmoud S.M., Paish E.C., Powe D.G., Macmillan R.D., Grainge M.J., Lee A.H., et al. Tumor-infi ltrating CD8+ lymphocytes predict clinical outcome in breast cancer. J Clin Oncol. 2011;29(15):1949–55. DOI: 10.1200/JCO.2010.30.5037Ono M., Tsuda H., Shimizu C., Yamamoto S., Shibata T., Yamamoto H., et al. Tumor-infi ltrating lymphocytes are correlated with response to neoadjuvant chemotherapy in triple-negative breast cancer. Breast Cancer Res Treat. 2012;132(3):793–805. DOI: 10.1007/s10549-011-1554-7Ono M., Tsuda H., Shimizu C., Yamamoto S., Shibata T., Yamamoto H., et al. Tumor-infi ltrating lymphocytes are correlated with response to neoadjuvant chemotherapy in triple-negative breast cancer. Breast Cancer Res Treat. 2012;132(3):793–805. DOI: 10.1007/ s10549-011-1554-7West N.R., Milne K., Truong P.T., Macpherson N., Nelson B.H., Watson P.H. Tumor-infi ltrating lymphocytes predict response to anthracycline-based chemotherapy in estrogen receptor-negative breast cancer. Breast Cancer Res. 2011;13(6):R126. DOI: 10.1186/bcr3072West N.R., Milne K., Truong P.T., Macpherson N., Nelson B.H., Watson P.H. Tumor-infi ltrating lymphocytes predict response to anthracycline-based chemotherapy in estrogen receptor-negative breast cancer. Breast Cancer Res. 2011;13(6):R126. DOI: 10.1186/bcr3072Seo A.N., Lee H.J., Kim E.J., Kim H.J., Jang M.H., Lee H.E., et al. Tumour-infi ltrating CD8+ lymphocytes as an independent predictive factor for pathological complete response to primary systemic therapy in breast cancer. Br J Cancer. 2013;109(10):2705–13. DOI: 10.1038/ bjc.2013.634Seo A.N., Lee H.J., Kim E.J., Kim H.J., Jang M.H., Lee H.E., et al. Tumour-infi ltrating CD8+ lymphocytes as an independent predictive factor for pathological complete response to primary systemic therapy in breast cancer. Br J Cancer. 2013;109(10):2705–13. DOI: 10.1038/ bjc.2013.634Oda N., Shimazu K., Naoi Y., Morimoto K., Shimomura A., Shimoda M., et al. Intratumoral regulatory T cells as an independent predictive factor for pathological complete response to neoadjuvant paclitaxel followed by 5-FU/epirubicin/cyclophosphamide in breast cancer patients. Breast Cancer Res Treat. 2012;136(1):107–16. DOI: 10.1007/ s10549-012-2245-8Oda N., Shimazu K., Naoi Y., Morimoto K., Shimomura A., Shimoda M., et al. Intratumoral regulatory T cells as an independent predictive factor for pathological complete response to neoadjuvant paclitaxel followed by 5-FU/epirubicin/cyclophosphamide in breast cancer patients. Breast Cancer Res Treat. 2012;136(1):107–16. DOI: 10.1007/s10549-012-2245-8Issa-Nummer Y., Darb-Esfahani S., Loibl S., Kunz G., Nekljudova V., Schrader I., et al. Prospective validation of immunological infi ltrate for prediction of response to neoadjuvant chemotherapy in HER2-negative breast cancer — a substudy of the neoadjuvant GeparQuinto trial. PLoS One. 2013;8(12):e79775. DOI: 10.1371/journal.pone.0079775Issa-Nummer Y., Darb-Esfahani S., Loibl S., Kunz G., Nekljudova V., Schrader I., et al. Prospective validation of immunological infi ltrate for prediction of response to neoadjuvant chemotherapy in HER2-negative breast cancer — a substudy of the neoadjuvant GeparQuinto trial. PLoS One. 2013;8(12):e79775. DOI: 10.1371/journal.pone.0079775Ladoire S., Mignot G., Dabakuyo S., Arnould L., Apetoh L., Rébé C., et al. In situ immune response aft er neoadjuvant chemotherapy for breast cancer predicts survival. J Pathol. 2011;224(3):389–400. DOI: 10.1002/ path.2866Ladoire S., Mignot G., Dabakuyo S., Arnould L., Apetoh L., Rébé C., et al. In situ immune response aft er neoadjuvant chemotherapy for breast cancer predicts survival. J Pathol. 2011;224(3):389–400. DOI: 10.1002/path.2866Li Y., Tang J., Pan D.X., Sun L.D., Chen C., Liu Y., et al. Versatile imaging and therapeutic platform based on dual-band luminescent lanthanide nanoparticles toward tumor metastasis inhibition. ACS Nano. 2016;10(2):2766–73. DOI: 10.1021/acsnano.5b07873Li Y., Tang J., Pan D.X., Sun L.D., Chen C., Liu Y., et al. Versatile imaging and therapeutic platform based on dual-band luminescent lanthanide nanoparticles toward tumor metastasis inhibition. ACS Nano. 2016;10(2):2766–73. DOI: 10.1021/ acsnano.5b07873Liu J., Huang L., Tian X., Chen X., Shao Y., Xie F., et al. Magnetic and fl uorescent Gd2 O3 :Yb3+/Ln3+ nanoparticles for simultaneous upconversion luminescence/MR dual modal imaging and NIR-induced photodynamic therapy. Int J Nanomedicine. 2016;12:1–14. DOI: 10.2147/ IJN.S118938Liu J., Huang L., Tian X., Chen X., Shao Y., Xie F., et al. Magnetic and fl uorescent Gd2 O3 :Yb3+/Ln3+ nanoparticles for simultaneous upconversion luminescence/MR dual modal imaging and NIR-induced photodynamic therapy. Int J Nanomedicine. 2016;12:1–14. DOI: 10.2147/IJN.S118938Zhou Y., Shao N., Aierken N., Xie C., Ye R., Qian X., et al. Prognostic value of tumor-infi ltrating Foxp3+ regulatory T cells in patients with breast cancer: a meta-analysis. J Cancer. 2017;8(19):4098–105. DOI: 10.7150/jca.21030Zhou Y., Shao N., Aierken N., Xie C., Ye R., Qian X., et al. Prognostic value of tumor-infi ltrating Foxp3+ regulatory T cells in patients with breast cancer: a meta-analysis. J Cancer. 2017;8(19):4098–105. DOI: 10.7150/jca.21030Demir L., Yigit S., Ellidokuz H., Erten C., Somali I., Kucukzeybek Y., et al. Predictive and prognostic factors in locally advanced breast cancer: eff ect of intratumoral FOXP3+ Tregs. Clin Exp Metastasis. 2013;30(8):1047–62. DOI: 10.1007/s10585-013-9602-9Demir L., Yigit S., Ellidokuz H., Erten C., Somali I., Kucukzeybek Y., et al. Predictive and prognostic factors in locally advanced breast cancer: effect of intratumoral FOXP3+ Tregs. Clin Exp Metastasis. 2013;30(8):1047–62. DOI: 10.1007/s10585- 013-9602-9.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.